LC-MS/MS-Methode zur Bestimmung von r-RGD-Hirudin in humanem Plasma und ihre Anwendung in einer Pharmakokinetikstudie

OBJECTIVE: This study aimed to develop a simple, sensitive, and selective Liquid chromatography with a Mass spectroscopic method for simultaneous quantification of a recombinant bifunctional hirudin (r-RGD-Hirudin, Bifunctional Hirudin, BFH) in human plasma and verify its effectiveness. METHODS: The analytes and the internal standards from human plasma were extracted using the solid-phase extraction technique. The reconstituted samples were chromatographed on Waters C18 column (BEH 50 × 2.1 mm, 1.7 μm) using a mixture of 0.1% formic acid/acetonitrile (85%/15%, v/v) with gradient elution as the initial mobile phase at a flow rate of 0.3 mL/min. RESULTS: The effectiveness of the proposed method was verified over the concentration range of 10-2000 ng/mL for r-RGD-Hirudin. A linear calibration curve was obtained. The precision and accuracy of BFH in the intra- and inter-day runs fell within the range of ±15% at LQC, GMQC, MQC and HQC concentrations. The extraction recoveries and matrix effect at two quality control (QC) levels for BFH were confirmed to conform to the relevant requirement. CONCLUSION: The proposed method was successfully adapted to examine the pharmacokinetics of BFH in 40 Chinese healthy volunteers, respectively.

Abstract aus PubMed (NCBI) für den zitierten Eintrag, in der Originalsprache wiedergegeben. Maßgeblich ist die Fassung der Originalpublikation.

Das Abstract wird nicht übersetzt, damit die eigene Wortwahl der Autoren erhalten bleibt.

Die Arbeit beschreibt die Entwicklung und Validierung einer LC-MS/MS-Methode zur Quantifizierung von rekombinantem bifunktionalem Hirudin (r-RGD-Hirudin, BFH) in humanem Plasma. Die Analyten und internen Standards wurden mittels Festphasenextraktion gewonnen und auf einer Waters-C18-Säule (BEH 50 × 2,1 mm, 1,7 µm) chromatographiert (Gradientenelution, Anfangs-Fließmittel 0,1 % Ameisensäure/Acetonitril 85/15, v/v; 0,3 ml/min). Die Methode war über 10–2 000 ng/ml linear; Präzision und Genauigkeit lagen innerhalb ±15 %. Die Methode wurde erfolgreich zur Pharmakokinetik von BFH bei 40 gesunden chinesischen Probanden eingesetzt.

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