Экспрессия рекомбинантного гирудина в молоке трансгенных мышей под контролем промотора козьего β-казеина

Hirudin, isolated from the leech Hirudo medicinalis, inhibits thrombin directly and several expression systems have been used to produce recombinant Hirudin (rHirudin) for pharmaceutical purposes. A DNA fragment containing the Hirudin coding sequence and goat beta-casein secretion signal was chemically synthesized in this study. The synthetic DNA then was further constructed into a goat beta-casein expression vector for mouse transgenesis. Four lines of transgenic mice were successfully developed and one line showed a meaningful anti-thrombin activity of 40,000 anti-thrombin units (ATU)/mL in their milk. In this animal line, Hirudin mRNA was found in samples of uterus and kidney with insignificant anti-thrombin activity (</= 280 ATU/g wet tissue); however, mammary glands showed a higher activity of 780 ATU/g wet tissue. Transgenic mice showed no evident physical abnormality. The purified rHirudin was further analyzed by amino acid analysis and was found to contain a tyrosine O-sulfate residue that is absent in rHirudin expression either through Escherichia coli or yeast host systems. Experimental results demonstrated that the beta-casein-promoted Hirudin transgene could be successfully expressed in a murine model and may be applicable to large mammals such as livestock for mass production of rHirudin for pharmaceuticals.

Аннотация взята из PubMed (NCBI) для цитируемой записи и приводится на языке оригинала. Авторитетной является версия в исходной публикации.

Аннотация оставлена без перевода, чтобы сохранить собственные формулировки авторов.

Гирудин из Hirudo medicinalis ингибирует тромбин. Синтезирован фрагмент ДНК с кодирующей последовательностью гирудина и сигналом секреции β-казеина козы, создан вектор для трансгенеза мышей. В одной из четырёх линий трансгенных мышей активность в молоке достигла 40 000 ATU/мл; в матке и почках она не превышала 280 ATU/г, в молочных железах составляла 780 ATU/г. Очищенный rHirudin содержал тирозин-O-сульфат, отсутствующий при продукции в E. coli и дрожжах; видимых отклонений у мышей не было, и авторы допускают применимость подхода к крупным сельскохозяйственным животным.

Узнайте, как это исследование связано с клинической практикой

Другие рецензируемые исследования в разделе «Фармакология секрета слюнных желёз».

• Медицинские пиявки и гирудотерапия — Gödekmerdan A et al. (2011)
• Перекисное окисление липидов слюны у пациентов с постковидным синдромом на фоне гирудотерапии — Serikbayeva S et al. (2024)
• Лечение медицинскими пиявками при болевых синдромах: нарративный обзор — Koeppen D, Aurich M, Rampp T (2014)
• Иммуномодулирующие эффекты экстракта слюны медицинской пиявки на активированные макрофаги in vitro — Ayhan H et al. (2024)
• Ингибиторы протеиназ медицинской пиявки Hirudo medicinalis — Baskova I, Zavalova L (2001)
• Полифункциональность дестабилазы — лизоцима медицинской пиявки — Baskova I, Zavalova L (2008)
• «Удвоение»: идентификация и характеристика тандем-гирудина из азиатской медицинской пиявки Hirudinaria manillensis — Lukas P et al. (2022)
• Применение медицинской пиявки в лечении заболеваний уха — Seleznev K et al. (1992)
• Рекомбинантная дестабилаза из Hirudo medicinalis способна растворять тромбы человека in vitro — Bobrovsky P et al. (2021)
• Влияние рассеяния углеродных нанотрубок в окружающей среде на водного беспозвоночного Hirudo medicinalis — Girardello R et al. (2015)

Все исследования, проанализированные ASH →