Expression of recombinant Hirudin in transgenic mice milk driven by the goat beta-casein promoter
Research article published in Biotechnol J (2008)
Abstract
Hirudin, isolated from the leech Hirudo medicinalis, inhibits thrombin directly and several expression systems have been used to produce recombinant Hirudin (rHirudin) for pharmaceutical purposes. A DNA fragment containing the Hirudin coding sequence and goat beta-casein secretion signal was chemically synthesized in this study. The synthetic DNA then was further constructed into a goat beta-casein expression vector for mouse transgenesis. Four lines of transgenic mice were successfully developed and one line showed a meaningful anti-thrombin activity of 40,000 anti-thrombin units (ATU)/mL in their milk. In this animal line, Hirudin mRNA was found in samples of uterus and kidney with insignificant anti-thrombin activity (</= 280 ATU/g wet tissue); however, mammary glands showed a higher activity of 780 ATU/g wet tissue. Transgenic mice showed no evident physical abnormality. The purified rHirudin was further analyzed by amino acid analysis and was found to contain a tyrosine O-sulfate residue that is absent in rHirudin expression either through Escherichia coli or yeast host systems. Experimental results demonstrated that the beta-casein-promoted Hirudin transgene could be successfully expressed in a murine model and may be applicable to large mammals such as livestock for mass production of rHirudin for pharmaceuticals.
Abstract sourced from PubMed (NCBI) for the cited record. See the original publication for the authoritative version.
Резюме
Transgenic mice secreted recombinant hirudin in milk at 40000 anti-thrombin units/mL; purified rHirudin contained tyrosine O-sulfate residue absent in E.
Почему это важно для гирудотерапии
В данном исследовании был получен рекомбинантный гирудин в молоке трансгенных мышей с использованием химически синтезированной кодирующей последовательности гирудина с секреторным сигналом козьего бета-казеина; была получена одна линия, экспрессирующая 40 000 антитромбиновых единиц (АТЕ)/мл в молоке. В ткани молочной железы было выявлено 780 АТЕ/г сырой ткани, тогда как в других органах активность была незначительной; очищенный rHirudin содержал остаток O-сульфата тирозина, отсутствующий в продукте, экспрессированном в E. coli или дрожжах, и у трансгенных мышей не наблюдалось явных физических аномалий. Для ASH данная работа имеет значение, поскольку она посвящена рекомбинантному производству гирудина — ключевого антикоагулянта, производного пиявок, — с потенциальной применимостью к крупным млекопитающим для фармацевтического массового производства. Ограничение: данное исследование представляет собой демонстрацию концепции в области биотехнологии трансгенных животных; не представлены данные по фармакологической эффективности, безопасности или клинические данные, за исключением общего физического состояния.
Цитирование
Expression of recombinant Hirudin in transgenic mice milk driven by the goat beta-casein promoter.
Yen CH et al. · Biotechnol J, 2008
Связанный клинический контекст
Узнайте, как это исследование связано с клинической практикой
Добавлено в библиотеку ASH: May 27, 2026 · Последнее обновление сайта: 18 июня 2026 г.