Decrease of hirudin degradation by deleting the KEX1 gene in recombinant Pichia pastoris
Research article published in Yeast (Chichester, England) (2008)
Abstract
Our previous study on recombinant hirudin production in Pichia pastoris demonstrated that, although the total productivity of hirudin was fairly high, its degradation was still severe, even if many engineering methods were applied to improve cell viability and reduce the release of intracellular proteinases. In this work, a pop-in/pop-out method, replacing the auxotrophic marker ARG4 gene with the resistant marker sh ble gene, was used to delete the KEX1 gene to reduce hirudin degradation in P. pastoris GS115Hir. Using this strategy, hirudin degradation was greatly decreased. At the same wet cell weight and cell viability, the percentage of intact hirudin Hir65 in total hirudin in strain GS115HirDeltakex1 was always kept as high as 90% in the initial stage of the methanol fermentation phase and above 62% even in the later stage of the methanol fermentation phase, whereas the percentage for the undeleted strain GS115Hir was only about 40% in the whole methanol fermentation phase. As a result, the intact hirudin Hir65 concentration could maximally reach 2.4 g/l in GS115HirDeltakex1 while it was only 1.1 g/l in GS115Hir.
Abstract sourced from PubMed (NCBI) for the cited record. See the original publication for the authoritative version.
Резюме
Our previous study on recombinant hirudin production in Pichia pastoris demonstrated that, although the total productivity of hirudin was fairly high, its degradation was still severe, even if many engineering methods were applied to improve cell viability and reduce the release of intracellular proteinases.
Почему это важно для гирудотерапии
Настоящее исследование изучало продукцию рекомбинантного гирудина в Pichia pastoris, конкретно проверяя, может ли делеция гена KEX1 снизить деградацию интактного гирудина (Hir65) при метанольной ферментации. Штамм с делецией KEX1 поддерживал долю интактного гирудина приблизительно 90% на начальном этапе и свыше 62% на более поздних стадиях ферментации по сравнению с лишь ~40% в штамме без делеции, при этом концентрация интактного гирудина достигала 2,4 г/л по сравнению с 1,1 г/л. Это имеет высокую значимость для области ASH, поскольку затрагивает практический биотехнологический «узкий» момент в производстве ключевого антикоагулянта, получаемого из пиявки. Однако это исследование по промышленной микробиологии и оптимизации ферментации, без клинических данных или данных на животных; его значимость ограничена рекомбинантным производством, а не терапевтическим применением гирудотерапии.
Цитирование
Decrease of hirudin degradation by deleting the KEX1 gene in recombinant Pichia pastoris
Ni Z et al. · Yeast (Chichester, England), 2008
Связанный клинический контекст
Узнайте, как это исследование связано с клинической практикой
Добавлено в библиотеку ASH: May 27, 2026 · Последнее обновление сайта: 18 июня 2026 г.