Исключение атмосферного воздуха в пробирках при инкубировании цельной крови человека минимизирует фоновую активацию комплемента

BACKGROUND: In vitro, the complement system can be studied in test tubes incubated with anticoagulated human whole-blood. Background activation of complement may mask inflammatory signals. Air bubbles are known to activate complement. We examined if removing ambient air from test tubes before incubation reduced background complement activation. METHODS: Blood from twelve donors was anticoagulated with the thrombin inhibitor lepirudin and incubated with either no air, ambient air or air bubbles in polypropylene tubes at 37 °C for 180 min on a roller mixer. After incubation, EDTA was added, plasma isolated and analyzed for seven complement activation products using ELISA. Results are presented as means with 95% confidence intervals. RESULTS: Blood incubated without air had significantly lower complement activation compared to blood incubated with ambient air; C4d 273 (192-364) vs. 379 (263-494) ng/mL (p = 0.002), C4bc 8.2 (4.1-13) vs. 12 (3.2-21) CAU/mL (p = 0.01), C3a 1351 (873-1838) vs. 2944 (2315-3572) ng/mL (p = 0.0005), C3bc 31 (17-46) vs. 68 (52-84) CAU/mL (p = 0.002), C3bBbP 134 (97-171) vs. 427 (358-506) CAU/mL (p < 0.0001), C5a 3.5 (1.9-5 0.2) vs. 15 (1.8-27)) ng/mL (p = 0.003), TCC 4.6 (2.8-6.3) vs. 9.9 (7.3-12) CAU/mL (p = 0.006). At the end of the experiment blood incubated with air bubbles had a higher complement activation than blood incubated with ambient air with an average 26 fold increase (range 1.6-59) from baseline of all activation products; C4d 551 (337-766) ng/mL, C4bc 21 (5.0-36) CAU/mL, C3a 3983 (3518-4448) ng/mL, C4bc 103 (86-121) CAU/mL, C3bBbP 626 (543-708) CAU/mL, C5a 10 (2.8-18) ng/mL and TCC 10 (6.0-14) CAU/mL. CONCLUSION: Avoiding air in test tubes during whole-blood experiments reduced background complement activation substantially and represents an important improvement to the lepirudin whole-blood model. This could also apply to other in vitro models.

Аннотация взята из PubMed (NCBI) для цитируемой записи и приводится на языке оригинала. Авторитетной является версия в исходной публикации.

Аннотация оставлена без перевода, чтобы сохранить собственные формулировки авторов.

Цельную кровь 12 доноров, стабилизированную лепирудином, инкубировали 180 мин при 37 °C без воздуха, с атмосферным воздухом или с пузырьками воздуха, измеряя семь продуктов активации комплемента. Без воздуха активация была значимо ниже: C3a 1351 против 2944 нг/мл (p = 0,0005), C3bBbP 134 против 427 CAU/мл (p < 0,0001); пузырьки воздуха усиливали все продукты в среднем в 26 раз (1,6–59). Исключение воздуха существенно снижает фоновую активацию комплемента, улучшая лепирудиновую модель цельной крови; вывод может относиться и к другим моделям in vitro.

Узнайте, как это исследование связано с клинической практикой

Другие рецензируемые исследования в разделе «Разработка лекарственных препаратов».

• Гирудотерапия в медицине и стоматологии — Jha K et al. (2015)
• Лечение пиявками: история — Hyson J (2005)
• Гирудины азиатской медицинской пиявки Hirudinaria manillensis: те же, но другие — Lukas P et al. (2019)
• Транскриптомный анализ слюнной железы медицинской пиявки Hirudo nipponia — Lu Z et al. (2018)
• Молекулярно-динамические и фармакологические исследования вариантов гирудина Hirudinaria manillensis и Hirudo medicinalis, созданных методами белковой инженерии — Sun Y et al. (2022)
• Бесклеточный синтез варианта 1 гирудина кровососущей пиявки Hirudo medicinalis — Wüstenhagen D et al. (2020)
• Получение вариантов гирудина с помощью генно-инженерной микробной фабрики — Zhang J, Lan N (2018)
• Гирудин при гепарин-индуцированной тромбоцитопении — Lubenow N, Greinacher A (2002)
• Гирудин ослабляет диабетическую нефропатию путём ингибирования Gsdmd-опосредованного пироптоза — Han J et al. (2023)
• Гирудин как альтернативный антикоагулянт: исторический обзор — Markwardt F (2002)

Все исследования, проанализированные ASH →