Revisiting the effect of cholesteryl sulfate on clotting and fibrinolysis: Inhibition of human thrombin and other human blood proteases
Research article published in Heliyon (2024)
Abstract
Cholesteryl sulfate (CS) was quantitatively synthesized by microwave-assisted sulfonation of cholesterol followed by sodium exchange chromatography. In vitro effects of CS on human thrombin and other serine proteases of the coagulation and fibrinolysis processes were investigated using a series of biochemical and biophysical techniques. CS was found to inhibit thrombin with an IC50 value of 140.8 ± 21.8 μM at pH 7.4 and 25 ○C. Michaelis-Menten kinetics indicated that thrombin inhibition by CS is non-competitive (allosteric) in nature. Fluorescence-based binding studies indicated that CS binds to thrombin with a KD value of 180.9 ± 18.9 μM. Given the lack of competition with heparins and a hirudin peptide in competitive inhibition assays, it appears that CS does not bind to thrombin's exosites 1 or 2 and it rather recognizes a different allosteric exosite. CS was found to partially inhibit thrombin-mediated fibrinogen activation with an IC50 value of 175.5 ± 17.5 μM and efficacy of ∼26.0 ± 6.6%. Likewise, CS selectively doubled the activated partial thromboplastin time with EC2x of 521 μM. Interestingly, CS was found to also inhibit factors Xa and XIa as well as plasmin with IC50 values of ∼85-250 μM and efficacy of 94-100%. Nevertheless, CS most potently inhibited factor XIIa with an IC50 Value of ∼17 μM and efficacy of 60%. Surprisingly, CS did not inhibit factor IXa. These results encourage further in vitro and in vivo investigation of CS to better understand its (patho-) physiological roles in coagulation and hemostasis.
Abstract sourced from PubMed (NCBI) for the cited record. See the original publication for the authoritative version.
Резюме
Cholesteryl sulfate (CS) was quantitatively synthesized by microwave-assisted sulfonation of cholesterol followed by sodium exchange chromatography.
Почему это важно для гирудотерапии
В данном исследовании in vitro был синтезирован холестерилсульфат (CS) и охарактеризованы его ингибирующие эффекты в отношении человеческого тромбина и других протеаз системы свёртывания/фибринолиза. CS ингибировал тромбин (IC50 ~140,8 мкМ) путём неконкурентного (аллостерического) связывания, частично ингибировал активацию фибриногена и удлинял АЧТВ; он также ингибировал факторы Xa, XIa, XIIa и плазмин, но не фактор IXa. Конкурентные ингибирующие анализы не выявили конкуренции с гепаринами или пептидом гирудина, что указывает на связывание CS с отдельным аллостерическим экзосайтом тромбина. Для области ASH связь является косвенной: пептид гирудина используется как инструмент для картирования связывания с экзосайтом-1 тромбина, подтверждая, что CS действует в другом участке, однако гирудин не является исследуемым препаратом. Исследование посвящено синтетическому стеролсульфату, а не гирудотерапии или секретому пиявки; релевантность ограничивается предоставлением механистического контекста об ингибировании тромбина, отличном от механизма действия гирудина.
Цитирование
Revisiting the effect of cholesteryl sulfate on clotting and fibrinolysis: Inhibition of human thrombin and other human blood proteases
Al-Horani RA · Heliyon, 2024
Связанный клинический контекст
Узнайте, как это исследование связано с клинической практикой
Добавлено в библиотеку ASH: May 27, 2026 · Последнее обновление сайта: 18 июня 2026 г.