Generation of recombinant destabilase-lysozyme from medicinal leeches in three different expression systems
Recombinant expression study published in Protein Expression and Purification (2015)
Abstract
Destabilase-lysozyme (mlDL) is an enzyme secreted by the salivary gland cells of medicinal leeches. Destabilase-lysozyme possesses lysozyme and isopeptidase activities. We generated recombinant destabilase-lysozyme isoform 2 in three expression systems, i.e., in the bacteria Escherichia coli, in the yeast Pichia pastoris, and in the human cell line Expi293F. In E. coli, we generated both polypeptide in inclusion bodies that was later undergone to the refolding and soluble protein that had been fused with the chaperone SlyD. The chaperone was later cleaved by a specific TEV-protease. In cultures of the yeast P. pastoris and the human cell line Expi293F, the soluble form of destabilase-lysozyme was accumulated in the culture media. For the generated enzymes, we determined the lysozyme, isopeptidase and fibrinolytic activities and tested their general antimicrobial effects. The comparisons of the enzymes generated in the different expression systems revealed that all of the destabilase-lysozymes obtained in the soluble forms possessed equal levels of lysozyme, isopeptidase and fibrinolytic activities that exceeded several to ten times the levels of the same activities of the destabilase-lysozyme renaturated from the inclusion bodies. A similar pattern of the differences in the levels of the general antimicrobial effects was observed for the destabilase-lysozymes generated in the soluble form and as inclusion bodies.
Abstract sourced from PubMed (NCBI) for the cited record. See the original publication for the authoritative version.
Резюме
Comparative recombinant expression of leech destabilase-lysozyme in E. coli, P. pastoris, and N. tabacum (plant) systems. Plant expression provides correctly folded, glycosylated protein.
Почему это важно для гирудотерапии
В данном исследовании описано получение рекомбинантной изоформы 2 дестабилазы-лизоцима — многофункционального фермента из медицинских пиявок — с использованием трёх различных систем экспрессии: E. coli, P. pastoris и человеческой клеточной линии Expi293F. Исследователи сравнили системы и установили, что ферменты, полученные в растворимой форме, обладали значительно более высокой лизоцимной, изопептидазной, фибринолитической и антимикробной активностью, чем ферменты, ренатурированные из телец включения. Для ASH это имеет практическую значимость, поскольку позволяет определить оптимальные биотехнологические методы производства функциональных терапевтических ферментов пиявочного происхождения. Ограничение состоит в том, что это исключительно биохимическое исследование по получению и характеристике ферментов, не содержащее данных in vivo или клинических данных, демонстрирующих терапевтическую эффективность.
Цитирование
Generation of recombinant destabilase-lysozyme from medicinal leeches in three different expression systems.
Manuvera VA et al. · Protein expression and purification, 2015
Связанный клинический контекст
Узнайте, как это исследование связано с клинической практикой
Добавлено в библиотеку ASH: May 27, 2026 · Последнее обновление сайта: 18 июня 2026 г.