Усиление антикоагулянтной активности гепаринового кофактора II

Heparin cofactor II (HCII) is a serpin whose thrombin inhibition activity is accelerated by glycosaminoglycans. We describe the novel properties of a carboxyl-terminal histidine-tagged recombinant HCII (rHCII-CHis(6)). Thrombin inhibition by rHCII-CHis(6) was increased >2-fold at approximately 5 microgram/ml heparin compared with wild-type recombinant HCII (wt-rHCII) at 50-100 microgram/ml heparin. Enhanced activity of rHCII-CHis(6) was reversed by treatment with carboxypeptidase A. We assessed the role of the HCII acidic domain by constructing amino-terminal deletion mutants (Delta1-52, Delta1-68, and Delta1-75) in wt-rHCII and rHCII-CHis(6). Without glycosaminoglycan, unlike wt-rHCII deletion mutants, the rHCII-CHis(6) deletion mutants were less active compared with full-length rHCII-CHis(6). With glycosaminoglycans, Delta1-68 and Delta1-75 rHCIIs were all less active. We assessed the character of the tag by comparing rHCII-CHis(6), rHCII-CAla(6), and rHCII-CLys(6) to wt-rHCII. Only rHCII-CHis(6) had increased activity with heparin, whereas all three mutants have increased heparin binding. We generated a carboxyl-terminal histidine-tagged recombinant antithrombin III to study the tag on another serpin. Interestingly, this mutant antithrombin III had reduced heparin cofactor activity compared with wild-type protein. In a plasma-based assay, the glycosaminoglycan-dependent inhibition of thrombin by rHCII-CHis(6) was significantly greater compared with wt-rHCII. Thus, HCII variants with increased function, such as rHCII-CHis(6), may offer novel reagents for clinical application.

Аннотация взята из PubMed (NCBI) для цитируемой записи и приводится на языке оригинала. Авторитетной является версия в исходной публикации.

Аннотация оставлена без перевода, чтобы сохранить собственные формулировки авторов.

Рекомбинантный кофактор II гепарина с C-концевой гексагистидиновой меткой (rHCII-CHis6) ингибировал тромбин более чем в 2 раза эффективнее при гепарине ~5 мкг/мл, чем белок дикого типа при 50–100 мкг/мл. Повышенную активность с гепарином проявлял только His-вариант, хотя усиленное связывание гепарина наблюдалось у всех трёх вариантов, а His-метка на антитромбине III, напротив, снижала его гепарин-кофакторную активность. В плазме гликозаминогликан-зависимое ингибирование тромбина этим вариантом было значимо выше, чем белком дикого типа. Авторы видят в таких вариантах новые реагенты для клиники.

Узнайте, как это исследование связано с клинической практикой

Другие рецензируемые исследования в разделе «Разработка лекарственных препаратов».

• Гирудотерапия в медицине и стоматологии — Jha K et al. (2015)
• Лечение пиявками: история — Hyson J (2005)
• Гирудины азиатской медицинской пиявки Hirudinaria manillensis: те же, но другие — Lukas P et al. (2019)
• Транскриптомный анализ слюнной железы медицинской пиявки Hirudo nipponia — Lu Z et al. (2018)
• Молекулярно-динамические и фармакологические исследования вариантов гирудина Hirudinaria manillensis и Hirudo medicinalis, созданных методами белковой инженерии — Sun Y et al. (2022)
• Бесклеточный синтез варианта 1 гирудина кровососущей пиявки Hirudo medicinalis — Wüstenhagen D et al. (2020)
• Получение вариантов гирудина с помощью генно-инженерной микробной фабрики — Zhang J, Lan N (2018)
• Гирудин при гепарин-индуцированной тромбоцитопении — Lubenow N, Greinacher A (2002)
• Гирудин ослабляет диабетическую нефропатию путём ингибирования Gsdmd-опосредованного пироптоза — Han J et al. (2023)
• Гирудин как альтернативный антикоагулянт: исторический обзор — Markwardt F (2002)

Все исследования, проанализированные ASH →