Determinación de los enlaces disulfuro en péptidos antimicrobianos de la familia macina mediante la combinación de proteómica top-down y bottom-up

UNLABELLED: Macins are a distinct class of antimicrobial peptides (AMPs) produced by leeches and Hydra. Their function depends strongly on their three-dimensional structure. In order to support structural elucidation of these AMPs, the knowledge and proper assignment of disulfide bonds formed in these cysteine-rich peptides is a prerequisite. In this report, we outline an analytical strategy, encompassing a combination of top-down MS based analytics and sequence-dependent enzyme cleavage under native conditions followed by high mass accuracy and high resolution MS/MS analysis by LTQ-Orbitrap MS to assign disulfide linkages of three members of the macin family, namely neuromacin, theromacin, and hydramacin-1. The results revealed that the eight cysteine residues conserved in all three macins form the same four disulfide bonds, i.e. [C1:C6], [C2:C5], [C3:C7], and [C4:C8]. Theromacin, which possess two additional cysteine residues, forms a fifth disulfide bond. BIOLOGICAL SIGNIFICANCE: Beside the high biological significance which is based on the inherent dependence of biological activity on the structural features of antimicrobial peptides (which holds true for entirely every protein), the presented analytical strategy will be of wide interest, as it widens the available toolbox for the analysis of this important posttranslational modification.

Resumen tomado de PubMed (NCBI) para el registro citado, en el idioma original. La versión de referencia es la de la publicación original.

El resumen se deja sin traducir para conservar la redacción original de los autores.

Las macinas son una clase diferenciada de péptidos antimicrobianos de sanguijuelas e Hydra, cuya función depende de su estructura tridimensional. Los autores combinaron MS top-down, escisión enzimática nativa y MS/MS en LTQ-Orbitrap para asignar los enlaces disulfuro de tres macinas: neuromacina, teromacina e hidramacina-1. Las ocho cisteínas conservadas forman los mismos cuatro enlaces [C1:C6], [C2:C5], [C3:C7] y [C4:C8]; teromacina, con dos cisteínas adicionales, forma un quinto. Los autores indican que la estrategia amplía el instrumental para esta modificación postraduccional.

Explore cómo esta investigación se conecta con la práctica clínica

Más estudios revisados por pares en la categoría «Genómica y proteómica».

• Leech Salivary Proteome and Transcriptome: 434 Deduced Protein Sequences — Liu Z, Tong X, Su Y, et al. (2019)
• Medicinal Leech Draft Genome — Anticoagulant Gene Survey — Kvist S, Manzano-Marín A, de Carle D, Trontelj P, Siddall ME (2020)
• La terapia con sanguijuelas (Hirudo medicinalis) atenúa las lesiones testiculares inducidas por isquemia/reperfusión testicular en un modelo animal — Davoodi F et al. (2021)
• Nueva proteína anticoagulante de la sanguijuela medicinal — Manuvera V et al. (2024)
• AIF-1 y RNASET2 desempeñan papeles complementarios en la respuesta inmunitaria innata de la sanguijuela medicinal — Baranzini N et al. (2019)
• Los péptidos antimicrobianos de la sanguijuela medicinal carentes de toxicidad representan una estrategia alternativa prometedora para combatir patógenos resistentes a antibióticos — Grafskaia E et al. (2019)
• Perspectivas estructurales sobre la actividad trombolítica de la destabilasa de la sanguijuela medicinal — Marin E et al. (2023)
• El genoma de la sanguijuela medicinal (Whitmania pigra) y un estudio genómico comparativo para la exploración de ingredientes bioactivos — Tong L et al. (2022)
• El SNC de la sanguijuela medicinal como modelo para estudios de exosomas en la comunicación cruzada entre microglía y neuronas — Raffo-Romero A et al. (2018)
• Transcriptomic profiling and the first spatial expression analysis of candidate genes in the salivary gland of the East Asian medicinal leech, Hirudo nipponia — Kim J et al. (2024)

Ver toda la investigación analizada por la ASH →