Producción mejorada de hirudina anticoagulante en Saccharomyces cerevisiae recombinante mediante integración cromosómica delta

Recombinant Saccharomyces cerevisiae strains were developed to overproduce an anticoagulant hirudin. The delta-sequences of the yeast retrotransposon Ty1 and URA3 were used as target sites for a hirudin expression cassette. High copy-number transformants were successfully selected using a dominant selection antibiotic, G418. The copy numbers of the hirudin expression cassette integrated into delta-sequences of the yeast chromosome ranged from five to ten copies per cell. Production of hirudin in the delta-integrated recombinant S. cerevisiae system increased over two-fold compared with the YEp-based episomal hirudin expression system. A linear relationship between the copy number of the hirudin expression cassette and hirudin expression level was observed up to 10 copies. The hirudin expression cassettes integrated into the yeast chromosome were stably maintained in non-selective culture conditions.

Resumen tomado de PubMed (NCBI) para el registro citado, en el idioma original. La versión de referencia es la de la publicación original.

El resumen se deja sin traducir para conservar la redacción original de los autores.

Se desarrollaron cepas recombinantes de Saccharomyces cerevisiae que sobreproducen hirudina anticoagulante. Las secuencias δ del retrotransposón Ty1 y URA3 sirvieron como dianas de un casete de expresión. Con G418 se seleccionaron transformantes con cinco a diez copias por célula. La producción de hirudina en el sistema δ-integrado aumentó más del doble frente al sistema YEp; hasta 10 copias hubo relación lineal entre número de copias y expresión, y los casetes fueron estables en condiciones no selectivas.

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