Antistasina, un inhibidor del factor Xa derivado de la sanguijuela. Análisis cinético de la inhibición enzimática e identificación del sitio reactivo

Antistasin is a 119-amino acid protein isolated from the salivary glands of the Mexican leech Haementeria officinalis. The determination of the primary structure of antistasin revealed that the protein is highly disulfide-bonded with a 2-fold internal homology. Antistasin exhibits a potent anticoagulant activity purportedly due to the selective inhibition of Factor Xa (Tuszinsky, G. P., Gasic, T. B., and Gasic, G. J. (1987) J. Biol. chem. 262, 9718-9723). In the present study a detailed kinetic analysis of the inhibitory interaction between antistasin and Factor Xa was performed. In addition, the specificity of antistasin was examined by testing its ability to inhibit a variety of serine proteinases. Utilizing purified antistasin and a tripetidyl p-nitroanilide substrate, antistasin was shown to act as a reversible inhibitor of Factor Xa which exhibits slow-tight binding kinetics. Antistasin reacts stoichiometrically with Factor Xa with inhibition displaying a mixed, primarily competitive type. The inhibition is partial in the presence of Ca2+ and becomes complete in the absence of Ca2+. The estimated dissociation constant for the enzyme-inhibitor complex is between 0.31 and 0.62 nM. After binding to Factor Xa, antistasin is cleaved at a single site to yield a modified inhibitor. Automated gas-phase sequence analysis of the modified inhibitor indicates the arginine residue at position 34 in antistasin occupies the P1 position of the reactive site. These data indicate that the leech has evolved a highly selective and potent inhibitor of coagulation Factor Xa that shares several mechanistic similarities with other serine proteinase inhibitors.

Resumen tomado de PubMed (NCBI) para el registro citado, en el idioma original. La versión de referencia es la de la publicación original.

El resumen se deja sin traducir para conservar la redacción original de los autores.

Antistasina, proteína de 119 aminoácidos de las glándulas salivales de la sanguijuela mexicana Haementeria officinalis, inhibe reversiblemente el factor Xa, con unión lenta y estrecha, estequiometría y carácter mixto predominantemente competitivo; la inhibición es parcial con Ca2+ y completa sin él, con constante de disociación estimada de 0,31 a 0,62 nM. La arginina 34 ocupa la posición P1 del sitio reactivo. Los autores concluyen que la sanguijuela ha desarrollado un inhibidor del factor Xa muy selectivo y potente.

Explore cómo esta investigación se conecta con la práctica clínica

Más estudios revisados por pares en la categoría «Genómica y proteómica».

• Leech Salivary Proteome and Transcriptome: 434 Deduced Protein Sequences — Liu Z, Tong X, Su Y, et al. (2019)
• Medicinal Leech Draft Genome — Anticoagulant Gene Survey — Kvist S, Manzano-Marín A, de Carle D, Trontelj P, Siddall ME (2020)
• La terapia con sanguijuelas (Hirudo medicinalis) atenúa las lesiones testiculares inducidas por isquemia/reperfusión testicular en un modelo animal — Davoodi F et al. (2021)
• Nueva proteína anticoagulante de la sanguijuela medicinal — Manuvera V et al. (2024)
• AIF-1 y RNASET2 desempeñan papeles complementarios en la respuesta inmunitaria innata de la sanguijuela medicinal — Baranzini N et al. (2019)
• Los péptidos antimicrobianos de la sanguijuela medicinal carentes de toxicidad representan una estrategia alternativa prometedora para combatir patógenos resistentes a antibióticos — Grafskaia E et al. (2019)
• Perspectivas estructurales sobre la actividad trombolítica de la destabilasa de la sanguijuela medicinal — Marin E et al. (2023)
• El genoma de la sanguijuela medicinal (Whitmania pigra) y un estudio genómico comparativo para la exploración de ingredientes bioactivos — Tong L et al. (2022)
• El SNC de la sanguijuela medicinal como modelo para estudios de exosomas en la comunicación cruzada entre microglía y neuronas — Raffo-Romero A et al. (2018)
• Transcriptomic profiling and the first spatial expression analysis of candidate genes in the salivary gland of the East Asian medicinal leech, Hirudo nipponia — Kim J et al. (2024)

Ver toda la investigación analizada por la ASH →