Separación de las actividades monomerizante y lisozímica de la destabilasa de la secreción de la glándula salival de la sanguijuela medicinal

Destabilase, endo-epsilon-(gamma-Glu)-Lys-isopeptidase, was prepared from the salivary gland secretion of the medicinal leech (Hirudo medicinalis). The secretion prepared by the known method of Rigbi et al. (1987) (secretion-K) lacks the destabilase-characteristic highly specific isopeptidase activity (the D-dimer-monomerizing activity) because of its degradation by proteolytic activity (the substrate of Glp-Ala-Ala-Leu-pNA) due to contamination with leech intestinal channel contents. Therefore, we have elaborated a new technique for preparation of a true leech secretion (secretion-I). This secretion is characterized by the complete absence of the leech intestinal channel contents and has no proteolytic activity. For the first time the destabilase-specific D-dimer-monomerizing and lysozyme activities were separated by fractionation of secretion-I by HPLC gel filtration through Superose S-12. For the purified destabilase preparation, these activities were separated by reversed-phase chromatography in an acetonitrile gradient (0-60%) in the presence of 0.1% trifluoroacetic acid. The monomerizing activity of destabilase is responsible for the ability of secretion-I to dissolve stabilized fibrin via isopeptidolysis of alpha-alpha and gamma-gamma fibrin chains bound by epsilon-(gamma-Glu)-Lys-isopeptide bonds.

Resumen tomado de PubMed (NCBI) para el registro citado, en el idioma original. La versión de referencia es la de la publicación original.

El resumen se deja sin traducir para conservar la redacción original de los autores.

De la secreción de la glándula salival de la sanguijuela medicinal se obtuvo destabilasa. La secreción-K (Rigbi et al., 1987) pierde la actividad isopeptidasa por contaminación intestinal. Los autores desarrollaron un método para obtener secreción verdadera (secreción-I), sin actividad proteolítica. Con HPLC de filtración en gel y cromatografía de fase inversa (acetonitrilo 0–60 %, ácido trifluoroacético al 0,1 %) se separaron por primera vez las actividades monomerizante y lisozímica; la monomerizante disuelve la fibrina estabilizada por isopeptidolisis de cadenas α-α y γ-γ.

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