Identifizierung und Charakterisierung eines neuen Neuropeptids (Neuropeptid Y-HS) aus der Speicheldrüse des Blutegels Haemadipsa sylvestris
Identification and characterization of a novel neuropeptide (neuropeptide Y-HS) from leech salivary gland of Haemadipsa sylvestris
Experimentelle Grundlagenstudie in der Zeitschrift Chin J Nat Med (2016)
Abstract
The present study was designed to identify immunomodulatory components from the leech salivary gland of Haemadipsa sylvestris. The Sephadex G-50, Resource(TM) S column chromatography and reverse-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) were used to isolate and purify the salivary gland extracts (SGE). Structural analysis of isolated compounds was based on Edman degradation and matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometer (MALDI-TOF-MS). The cDNA encoding the precursor of the compound was cloned from the cDNA library of the salivary gland of H. sylvestris. The levels of inflammatory mediators, including tumor necrosis factor-α (TNF-α), interferon γ (IFN-γ), interleukin-6 (IL-6), and monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1) were assayed using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The effects on cell proliferation and cell viability were observed using MTT assay. A novel neuropeptide Y (Neuropeptide Y-HS) from the leech salivary gland of H. sylvestris was purified and characterized. It was composed of 36 amino acid residues and the amino acid sequence was determined to be FLEPPERPAVFTSVEQMKSYIKALNDYYLLLGRPRF-NH2, containing an amidated C-terminus. It showed significant inhibitory effects on the production of inflammatory cytokines including TNF-α, IFN-γ, IL-6, and MCP-1. Neuropeptide Y was identified from leeches for the first time. The presence of neuropeptide Y-HS in leech salivary gland may help get blood meal from hosts and inhibit inflammation.
Abstract aus PubMed (NCBI) für den zitierten Eintrag, in der Originalsprache wiedergegeben. Maßgeblich ist die Fassung der Originalpublikation.
Das Abstract wird nicht übersetzt, damit die eigene Wortwahl der Autoren erhalten bleibt.
Zusammenfassung
Aus Speicheldrüsenextrakten von Haemadipsa sylvestris wurde durch Sephadex-G-50-, Resource-S- und RP-HPLC-Chromatographie ein neues Neuropeptid Y (Neuropeptid Y-HS) gereinigt; Sequenz und Vorläufer-cDNA wurden mittels Edman-Abbau, MALDI-TOF-MS und Klonierung aufgeklärt. Das Peptid aus 36 Aminosäureresten mit amidiertem C-Terminus hemmte die Produktion der Entzündungsmediatoren TNF-α, IFN-γ, IL-6 und MCP-1 signifikant. Es ist das erste aus Blutegeln identifizierte Neuropeptid Y; seine Anwesenheit könnte laut Autoren die Blutmahlzeit erleichtern und Entzündungen hemmen.
Warum dies für die Hirudotherapie relevant ist
Diese Studie isolierte und charakterisierte ein neuartiges 36 Aminosäuren umfassendes Neuropeptid Y (Neuropeptid Y-HS) aus den Speicheldrüsen des hämatophagen Blutegels Haemadipsa sylvestris, bestimmte dessen Sequenz und den amidierten C-Terminus und wies inhibitorische Effekte auf die Produktion von TNF-α, IFN-γ, IL-6 und MCP-1 in einem ELISA-basierten Assay nach, mit MTT-Assays zur Proliferation/Viabilität. Dies charakterisiert eine immunmodulatorische Komponente des Blutegelspeicheldrüsenkomplexes, möglicherweise bedeutsam dafür, wie Blutegel während des Saugens die Entzündung des Wirts unterdrücken. Die Einschränkung ist, dass H. sylvestris kein Standard-Blutegel für medizinische Zwecke ist, der in der Hirudotherapie verwendet wird, und die antientzündlichen Effekte ausschließlich in vitro gezeigt wurden, ohne Validierung am ganzen Tier, in vivo oder klinisch; die postulierte Rationale der Wirtsblutmahlzeit ist interpretativ und nicht direkt belegt.
Zitation
Literaturangabe (Vancouver-Stil)
Liu WH, Chen Y, Bai XW, Yao HM, Zhang XG, Yan XW, et al. Identification and characterization of a novel neuropeptide (neuropeptide Y-HS) from leech salivary gland of Haemadipsa sylvestris. Chin J Nat Med. 2016;14(9):677-682. doi:10.1016/S1875-5364(16)30080-2. PMID: 27667513
Die bibliografischen Angaben (Autoren, Band, Seiten, DOI) stammen aus dem PubMed-Eintrag.
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