Молекулярное клонирование и функциональный анализ дестабилазы из Hirudinaria manillensis

Destabilases are i-type lysozymes with isopeptidase activity and antibacterial and thrombolytic functions. In recent years, destabliases have been identified in an increasing number of invertebrates. Hirudinaria manillensis belonging to the Annelida, as one of the origins of leeches used in traditional Chinese medicine, which has high medicinal value, there have been few reports on the H. manillensis destabliase. In this study, the cDNA sequence of Hmdestabilase was cloned from the salivary glands of H. manillensis. The 3D Structural analysis indicated that Hmdestabilase is similar to other i-type lysozymes in that it adopts an ellipsoidal shape and has a large cleft containing the lysozyme active site. The docking results of Hmdestabilase protein with N-acetylglucosamine trimer molecule have shown that the location and number of hydrogen bonds are one of the key factors for the interaction between the protein and its substrate. The Hmdestabilase fusion protein obtained through the prokaryotic expression system has lysozyme and isopeptidase activities. In addition, Changes in sodium ion concentration in the environment affect the lysozyme activity of Hmdestabilase fusion protein. The above bioinformatic analysis and enzymatic function studies have shown that Hmdestabilase belongs to the i-type lysozyme family. qPCR analysis revealed that blood feeding significantly increased the mRNA expression of Hmdestabilase in the salivary glands of H. manillensis,and successfully priming the innate immune system against harmful microorganisms ingested with food. This study is helpful to elucidate the innate immune response of H. manillensis and promote the artificial breeding of H. manillensis.

Аннотация взята из PubMed (NCBI) для цитируемой записи и приводится на языке оригинала. Авторитетной является версия в исходной публикации.

Аннотация оставлена без перевода, чтобы сохранить собственные формулировки авторов.

Из слюнных желёз Hirudinaria manillensis клонирована кДНК дестабилазы Hmdestabilase. Трёхмерная структура сходна с лизоцимами i-типа; по данным докинга с тримером N-ацетилглюкозамина, расположение и число водородных связей — ключевой фактор связывания субстрата. Гибридный белок из прокариотической системы экспрессии обладает лизоцимной и изопептидазной активностями, причём лизоцимная зависит от концентрации ионов натрия. Кровососание, по данным qPCR, значительно повышало экспрессию мРНК Hmdestabilase в слюнных железах, подготавливая врождённый иммунитет к микробам из пищи. Полученные данные помогают объяснить иммунный ответ пиявки и содействуют её искусственному разведению.

Узнайте, как это исследование связано с клинической практикой

Другие рецензируемые исследования в разделе «Фармакология секрета слюнных желёз».

• Медицинские пиявки и гирудотерапия — Gödekmerdan A et al. (2011)
• Перекисное окисление липидов слюны у пациентов с постковидным синдромом на фоне гирудотерапии — Serikbayeva S et al. (2024)
• Лечение медицинскими пиявками при болевых синдромах: нарративный обзор — Koeppen D, Aurich M, Rampp T (2014)
• Иммуномодулирующие эффекты экстракта слюны медицинской пиявки на активированные макрофаги in vitro — Ayhan H et al. (2024)
• Ингибиторы протеиназ медицинской пиявки Hirudo medicinalis — Baskova I, Zavalova L (2001)
• Полифункциональность дестабилазы — лизоцима медицинской пиявки — Baskova I, Zavalova L (2008)
• «Удвоение»: идентификация и характеристика тандем-гирудина из азиатской медицинской пиявки Hirudinaria manillensis — Lukas P et al. (2022)
• Применение медицинской пиявки в лечении заболеваний уха — Seleznev K et al. (1992)
• Рекомбинантная дестабилаза из Hirudo medicinalis способна растворять тромбы человека in vitro — Bobrovsky P et al. (2021)
• Влияние рассеяния углеродных нанотрубок в окружающей среде на водного беспозвоночного Hirudo medicinalis — Girardello R et al. (2015)

Все исследования, проанализированные ASH →