Enhanced production of leech hyaluronidase by optimizing secretion and cultivation in Pichia pastoris

Research article published in Appl Microbiol Biotechnol (2015)

Последнее обновление: 18 июня 2026 г.Рецензент: ASH Editorial Board

Научная статья — обзор доказательных данныхСсылка на статью

Evidence: Preclinical (animal)Фармакология секрета слюнных желёзРазработка лекарственных препаратовKang Z et al. · Appl Microbiol Biotechnol, 2015

Abstract

Leech hyaluronidase (LHAase) was recently cloned and successfully expressed in Pichia pastoris. To increase its secretory expression level, four signal peptides (nsB, YTP1, SCS3, and HKR1) and six amphipathic peptides (APs) were comparatively investigated. After substitution with nsB and fusion with AP2, the production of LHAase was significantly increased, from 8.42 × 10(5) to 1.24 × 10(6) U/ml. Compared with the parental LHAase, the variant AP2-LHAase showed a lower optimum pH (5.0), higher optimum temperature (50 °C), and a broader range of thermal stability (20-60 °C). To further promote fermentative production of the variant AP2-LHAase, the cultivation temperature was systematically optimized according to cell viability and alcohol oxidase activity. Eventually, through a combination of N-terminal engineering and optimization of cultivation, the production of LHAase was improved to 1.68 × 10(6) U/ml, with a high productivity of 1.87 × 10(4) U/ml/h.

Abstract sourced from PubMed (NCBI) for the cited record. See the original publication for the authoritative version.

Publication typeJournal ArticleResearch Support, Non-U.S. Gov't

Indexed MeSH termsAnimalsCloning, MolecularEnzyme StabilityGenetic EngineeringHyaluronoglucosaminidaseHydrogen-Ion ConcentrationKineticsLeechesPichiaProtein Sorting SignalsTemperature

Резюме

Optimized signal peptide and amphipathic peptide fusion increased Pichia pastoris-secreted leech hyaluronidase 200-fold to 1.68 million U/ml.

Почему это важно для гирудотерапии

Данное исследование увеличило секреторную продукцию пиявочной гиалуронидазы (LHAase) в Pichia pastoris путём N-концевой инженерии — замены сигнального пептида nsB и слияния с амфипатическим пептидом (AP2) — в сочетании с систематической оптимизацией условий культивирования, достигнув продукции 1,68 × 10⁶ Ед/мл при высокой продуктивности 1,87 × 10⁴ Ед/мл/ч. Инженерный вариант AP2-LHAase проявил изменённые ферментативные свойства, включая более низкий оптимум pH, более высокую оптимальную температуру и более широкую термостабильность. Эта работа относится к области ASH, поскольку она касается масштабируемого производства пиявочного фермента. Однако исследование является чисто биотехнологическим, включающим

Цитирование

Enhanced production of leech hyaluronidase by optimizing secretion and cultivation in Pichia pastoris.

Kang Z et al. · Appl Microbiol Biotechnol, 2015

DOI

Связанный клинический контекст

Узнайте, как это исследование связано с клинической практикой

Salivary Gland Secretion Anti-Inflammatory Mechanisms Salivary Complex Drug Pipeline Drug Development Direct Thrombin Inhibitors Aquaculture Quality Control Otolaryngology Antimicrobial Peptides Safety Protocols

Отказ от ответственности — научно-образовательная информация

Информация на данной странице предоставлена исключительно в образовательных и информационных целях и не является медицинской консультацией, диагнозом или рекомендациями по лечению. Резюме клинических данных отражают опубликованную рецензируемую литературу и не подразумевают терапевтическую эффективность за пределами показаний, одобренных FDA.

Разрешение FDA 510(k) для медицинских пиявок ограничено конкретными показаниями. Исследовательские и офф-лейбл применения обозначены соответствующим образом. Перед клиническим использованием практикующим врачам следует руководствоваться действующими рекомендациями FDA, локальными протоколами и применимыми нормативно-правовыми актами штата.

ASH поддерживает строгую доказательную оценку всех применений гирудотерапии посредством контролируемых клинических исследований и рецензируемых публикаций.

Добавлено в библиотеку ASH: May 27, 2026 · Последнее обновление сайта: 18 июня 2026 г.