Amerikanische Gesellschaft für Hirudotherapie

Enhanced production of leech hyaluronidase by optimizing secretion and cultivation in Pichia pastoris

Research article published in Appl Microbiol Biotechnol (2015)

Zuletzt aktualisiert: 18. Juni 2026Geprüft von: ASH Editorial Board
Forschungsartikel – EvidenzreviewArtikelreferenz
Evidence: Preclinical (animal)Speichel-PharmakologieArzneimittelentwicklungKang Z et al. · Appl Microbiol Biotechnol, 2015

Abstract

Leech hyaluronidase (LHAase) was recently cloned and successfully expressed in Pichia pastoris. To increase its secretory expression level, four signal peptides (nsB, YTP1, SCS3, and HKR1) and six amphipathic peptides (APs) were comparatively investigated. After substitution with nsB and fusion with AP2, the production of LHAase was significantly increased, from 8.42 × 10(5) to 1.24 × 10(6) U/ml. Compared with the parental LHAase, the variant AP2-LHAase showed a lower optimum pH (5.0), higher optimum temperature (50 °C), and a broader range of thermal stability (20-60 °C). To further promote fermentative production of the variant AP2-LHAase, the cultivation temperature was systematically optimized according to cell viability and alcohol oxidase activity. Eventually, through a combination of N-terminal engineering and optimization of cultivation, the production of LHAase was improved to 1.68 × 10(6) U/ml, with a high productivity of 1.87 × 10(4) U/ml/h.

Abstract sourced from PubMed (NCBI) for the cited record. See the original publication for the authoritative version.

Publication typeJournal ArticleResearch Support, Non-U.S. Gov't
Indexed MeSH termsAnimalsCloning, MolecularEnzyme StabilityGenetic EngineeringHyaluronoglucosaminidaseHydrogen-Ion ConcentrationKineticsLeechesPichiaProtein Sorting SignalsTemperature

Zusammenfassung

Optimized signal peptide and amphipathic peptide fusion increased Pichia pastoris-secreted leech hyaluronidase 200-fold to 1.68 million U/ml.

Warum dies für die Hirudotherapie relevant ist

Diese Studie steigerte die Sekretionsproduktion von Egel-Hyaluronidase (LHAase) in Pichia pastoris durch N-terminales Engineering – Substitution des nsB-Signalpeptids und Fusion eines amphipathischen Peptids (AP2) – in Kombination mit systematischer Optimierung der Kultivierungsbedingungen und erreichte eine Produktion von 1,68 × 10⁶ U/ml bei einer hohen Produktivität von 1,87 × 10⁴ U/ml/h. Die entwickelte Variante AP2-LHAase wies veränderte enzymatische Eigenschaften auf, darunter einen niedrigeren optimalen pH-Wert, eine höhere optimale Temperatur und eine breitere thermische Stabilität. Diese Arbeit ist für das Fachgebiet der ASH relevant, da sie sich mit der skalierbaren Produktion eines Egel-Enzyms befasst. Die Studie ist jedoch rein biotechnologisch und beinhaltet

Zitation

Enhanced production of leech hyaluronidase by optimizing secretion and cultivation in Pichia pastoris.

Kang Z et al. · Appl Microbiol Biotechnol, 2015

DOI

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Zur ASH-Bibliothek hinzugefügt: May 27, 2026 · Letzte Aktualisierung der Website: 18. Juni 2026

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