Binding of the recombinant proteinase inhibitor eglin c from leech Hirudo medicinalis to human leukocyte elastase, bovine alpha-chymotrypsin and subtilisin Carlsberg: thermodynamic study
Biochemistry article published in Journal of Enzyme Inhibition (1988)
Abstract
The effect of pH and temperature on the apparent association equilibrium constant (Ka) for the binding of the recombinant proteinase inhibitor eglin c from leech Hirudo medicinalis to human leukocyte elastase (EC 3.4.21.37), bovine alpha-chymotrypsin (EC 3.4.21.1) and subtilisin Carlsberg (EC 3.4.21.14) has been investigated. On lowering the pH from 9.5 to 4.5, values of Ka for eglin c binding to the serine proteinases considered decrease thus reflecting the acid-pK shift of the invariant histidyl catalytic residue (His57 in human leukocyte elastase and bovine alpha-chymotrypsin, and His64 in subtilisin Carlsberg) from congruent to 6.9, in the free enzymes, to congruent to 5.1, in the enzyme:inhibitor adducts. At pH 8.0, values of the apparent thermodynamic parameters for eglin c binding are: human leukocyte elastase - Ka = 1.0 x 10(10) M-1, delta G phi = -13.4 kcal/mol, delta H phi = +1.8 kcal/mol, and delta S phi = +52 entropy units; bovine alpha-chymotrypsin -Ka = 5.0 x 10(9) M-1, delta G phi = -13.0 kcal/mol, delta H phi = +2.0 kcal/mol, and delta S phi = +51 entropy units; and subtilisin Carlsberg - Ka = 6.6 x 10(9) M-1, delta G phi = -13.1 kcal/mol, delta H phi = +2.0 kcal/mol, and delta S phi = +51 entropy units (values of Ka, delta G phi and delta S phi were obtained at 21 degrees C; values of delta H phi were temperature independent over the range explored, i.e. between 10 degrees C and 40 degrees C; 1 kcal = 4184J).(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)
Abstract sourced from PubMed (NCBI) for the cited record. See the original publication for the authoritative version.
Резюме
pH- and temperature-dependent thermodynamic analysis of leech eglin c binding to human leukocyte elastase, bovine alpha-chymotrypsin, and subtilisin Carlsberg reveals entropy-driven binding with comparable Ka ~5×10^9 M⁻¹ at pH 8.
Почему это важно для гирудотерапии
В данном термодинамическом исследовании изучалось связывание рекомбинантного эглина c — полученного из медицинской пиявки Hirudo medicinalis — с лейкоцитарной эластазой человека, α-химотрипсином крупного рогатого скота и субтилизином Carlsberg, а также влияние pH и температуры на константы равновесия ассоциации. Связывание характеризовалось очень высоким сродством (значения Ka порядка 10^9–10^10 М^-1) и благоприятной энтропийно-обусловленной термодинамикой, при этом инвариантный каталитический гистидильный остаток демонстрировал кислотный сдвиг pK при связывании ингибитора. Для ASH эта работа представляет ценность, поскольку она обеспечивает фундаментальную характеристику на молекулярном уровне механизма действия ингибитора протеаз из секретома пиявок. Оговорка состоит в том, что это чисто биофизическое исследование in vitro без клинических данных или данных на целых животных, и оно касается очищенного рекомбинантного белка, а не самой гирудотерапии.
Цитирование
Binding of the recombinant proteinase inhibitor eglin c from leech Hirudo medicinalis to human leukocyte elastase, bovine alpha-chymotrypsin and subtilisin Carlsberg: thermodynamic study.
Ascenzi P, Amiconi G, Menegatti E, Guarneri M, Bolognesi M, Schnebli HP · Journal of enzyme inhibition, 1988
Связанный клинический контекст
Узнайте, как это исследование связано с клинической практикой
Добавлено в библиотеку ASH: May 26, 2026 · Последнее обновление сайта: 18 июня 2026 г.