Characterizations of Hirudo medicinalis DNA promoters for targeted gene expression
Basic science / preclinical published in Journal of neuroscience methods (2006)
Abstract
The expression of exogenous genes in neurons and other cells has become a powerful means for studying the function of encoded proteins. We report here on the isolation and functional analysis of three Hirudo medicinalis actin gene promoters and the 5' UTR of a leech elongation factor-1alpha (HmEF-1alpha) gene. In situ hybridization labeling revealed that the EF-1alpha gene and one of the actins had pan-neuronal expression, whereas, the other two actin genes were expressed by the embryo's body wall musculature. Comparative analysis shows that they all display many features typical of actin and EF-1alpha promoters from other species, including canonical TATA box sequences and predicted general transcription factor binding sites (such as CCATT, CarB boxes and CG-rich regions). The ability of these 5' UTR sequences to drive expression of the enhanced green fluorescent protein (EGFP), leech cytoplasmic actin and leech synaptobrevin was examined. Direct intracellular nuclear, but not cytoplasmic, microinjection of each of the promoter sequences was found to produce reliably cellular expression of the reporter construct in both neuronal and muscle cells. These results introduce reliable and effective methods to selectively express genes in individual cells of the leech in vivo during embryonic development.
Abstract sourced from PubMed (NCBI) for the cited record. See the original publication for the authoritative version.
Резюме
The expression of exogenous genes in neurons and other cells has become a powerful means for studying the function of encoded proteins. We report here on the isolation and functional analysis of three Hirudo medicinalis actin gene promoters and the 5' UTR of a leech elongation factor-1alpha (HmEF-1alpha) gene.
Почему это важно для гирудотерапии
В данном исследовании были выделены и функционально охарактеризованы три промотора гена актина Hirudo medicinalis и 5' UTR гена элонгационного фактора-1альфа пиявки; продемонстрирована их способность управлять экспрессией репортёрных конструкций (EGFP, актин, синаптобревин) в идентифицированных нейрональных и мышечных клетках эмбрионов пиявок методом внутриядерной микроинъекции. Для сообщества ASH эта работа предоставляет фундаментальные молекулярно-генетические инструменты для медицинской пиявки — вида, центрального для гирудотерапии, — потенциально обеспечивая возможность будущих исследований направленной экспрессии терапевтически значимых генов пиявки, включая гены, кодирующие слюнные белки. Однако исследование не затрагивает компоненты слюнного секретома, биологически активные соединения или какие-либо клинические/терапевтические применения гирудотерапии; оно является исключительно работой по разработке инструментальных методов в области биологии развития и молекулярной биологии на эмбрионах. Следовательно, его релевантность клинической сфере ASH носит косвенный характер и ограничивается созданием методологической инфраструктуры, которая, в принципе, могла бы поддержать будущие механистические исследования биологии пиявки.
Цитирование
Characterizations of Hirudo medicinalis DNA promoters for targeted gene expression.
Baker M, Macagno E · Journal of neuroscience methods, 2006
Связанный клинический контекст
Узнайте, как это исследование связано с клинической практикой
Добавлено в библиотеку ASH: March 18, 2026 · Последнее обновление сайта: June 18, 2026