Sociedad Americana de Hirudoterapia

Enhanced production of leech hyaluronidase by optimizing secretion and cultivation in Pichia pastoris

Research article published in Appl Microbiol Biotechnol (2015)

Última actualización: 18 de junio de 2026Revisado por: ASH Editorial Board
Artículo de investigación — revisión de evidenciaReferencia del artículo
Evidence: Preclinical (animal)Farmacología salivalDesarrollo de fármacosKang Z et al. · Appl Microbiol Biotechnol, 2015

Abstract

Leech hyaluronidase (LHAase) was recently cloned and successfully expressed in Pichia pastoris. To increase its secretory expression level, four signal peptides (nsB, YTP1, SCS3, and HKR1) and six amphipathic peptides (APs) were comparatively investigated. After substitution with nsB and fusion with AP2, the production of LHAase was significantly increased, from 8.42 × 10(5) to 1.24 × 10(6) U/ml. Compared with the parental LHAase, the variant AP2-LHAase showed a lower optimum pH (5.0), higher optimum temperature (50 °C), and a broader range of thermal stability (20-60 °C). To further promote fermentative production of the variant AP2-LHAase, the cultivation temperature was systematically optimized according to cell viability and alcohol oxidase activity. Eventually, through a combination of N-terminal engineering and optimization of cultivation, the production of LHAase was improved to 1.68 × 10(6) U/ml, with a high productivity of 1.87 × 10(4) U/ml/h.

Abstract sourced from PubMed (NCBI) for the cited record. See the original publication for the authoritative version.

Publication typeJournal ArticleResearch Support, Non-U.S. Gov't
Indexed MeSH termsAnimalsCloning, MolecularEnzyme StabilityGenetic EngineeringHyaluronoglucosaminidaseHydrogen-Ion ConcentrationKineticsLeechesPichiaProtein Sorting SignalsTemperature

Resumen

Optimized signal peptide and amphipathic peptide fusion increased Pichia pastoris-secreted leech hyaluronidase 200-fold to 1.68 million U/ml.

Por qué esto importa para la hirudoterapia

Este estudio potenció la producción secretora de hialuronidasa de sanguijuela (LHAase) en Pichia pastoris mediante ingeniería del extremo N-terminal —sustituyendo el péptido señal nsB y fusionando un péptido anfipático (AP2)— combinada con la optimización sistemática de las condiciones de cultivo, logrando una producción de 1,68 × 10⁶ U/ml con una alta productividad de 1,87 × 10⁴ U/ml/h. La variante diseñada AP2-LHAase presentó propiedades enzimáticas alteradas, incluyendo un pH óptimo más bajo, una temperatura óptima más alta y una mayor estabilidad térmica. Este trabajo es relevante para el ámbito de ASH, dado que aborda la producción escalable de una enzima de sanguijuela. No obstante, el estudio es puramente biotecnológico, e implica

Citación

Enhanced production of leech hyaluronidase by optimizing secretion and cultivation in Pichia pastoris.

Kang Z et al. · Appl Microbiol Biotechnol, 2015

DOI

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Salivary Gland SecretionAnti-Inflammatory MechanismsSalivary ComplexDrug PipelineDrug DevelopmentDirect Thrombin InhibitorsAquacultureQuality ControlOtolaryngologyAntimicrobial PeptidesSafety Protocols

Añadido a la biblioteca ASH: May 27, 2026 · Última actualización del sitio: 18 de junio de 2026

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