Клонирование гена и экспрессия частичной последовательности Hirudomacin — антимикробного белка, уровень которого повышается у пиявки (Hirudo nipponica Whitman) после кровососания

The novel antimicrobial gene Hirudomacin (Hmc), with a 249-bp cDNA, encodes a mature protein of 61 amino acids and a 22-amino acid signal peptide. Hmc exhibits the highest similarity, at 90.1%, with macin family members found in the salivary gland of the leech Hirudo nipponica Whitman. A mature Hmc protein concentration of 219 μg/mL was detected using the Bradford method. The mature Hmc protein is 6862.82 Da and contains 8 cysteine residues. Antimicrobial assays showed a minimum bactericidal concentration and 50% lethal dose of 1.56 μg/mL and 0.78 μg/mL, respectively, for Staphylococcus aureus and 0.39 μg/mL and 0.195 μg/mL, respectively, for Bacillus subtilis. Transmission electron microscopy revealed membrane integrity disruption in S. aureus and B. subtilis, which resulted in bacterial lysis. The level of Hmc mRNA in the salivary gland during three blood meal stages indicated a remarkable trend of increase (P < .05), and western blotting demonstrated that among the three blood meal stages, expression of the mature Hmc protein was highest in both the salivary gland and intestine at the fed stage (P < .05). Immunofluorescence further showed the mature Hmc protein to be localized outside the cell nucleus, with the signal intensity in the salivary gland peaking at the fed stage (P < .05). In conclusion, the mature Hmc protein exhibits broad-spectrum antimicrobial effects against gram-positive and gram-negative bacteria, and a blood meal upregulates Hmc gene and protein expression in H. nipponica.

Аннотация взята из PubMed (NCBI) для цитируемой записи и приводится на языке оригинала. Авторитетной является версия в исходной публикации.

Аннотация оставлена без перевода, чтобы сохранить собственные формулировки авторов.

Клонирован и экспрессирован ген Hirudomacin (Hmc) пиявки Hirudo nipponica: кДНК 249 п.н. кодирует зрелый белок из 61 аминокислоты (6862,82 Да, 8 остатков цистеина), сходный на 90,1% с представителями семейства macin. Зрелый белок (219 мкг/мл) проявил бактерицидное действие в отношении Staphylococcus aureus (МБК 1,56 мкг/мл; ЛД50 0,78 мкг/мл) и Bacillus subtilis (0,39 и 0,195 мкг/мл), нарушая целостность мембраны бактерий. После кровососания уровни мРНК и белка Hmc в слюнных железах возрастали (p < 0,05), что позволяет предположить роль белка в противомикробной защите.

Узнайте, как это исследование связано с клинической практикой

Другие рецензируемые исследования в разделе «Фармакология секрета слюнных желёз».

• Медицинские пиявки и гирудотерапия — Gödekmerdan A et al. (2011)
• Перекисное окисление липидов слюны у пациентов с постковидным синдромом на фоне гирудотерапии — Serikbayeva S et al. (2024)
• Лечение медицинскими пиявками при болевых синдромах: нарративный обзор — Koeppen D, Aurich M, Rampp T (2014)
• Иммуномодулирующие эффекты экстракта слюны медицинской пиявки на активированные макрофаги in vitro — Ayhan H et al. (2024)
• Ингибиторы протеиназ медицинской пиявки Hirudo medicinalis — Baskova I, Zavalova L (2001)
• Полифункциональность дестабилазы — лизоцима медицинской пиявки — Baskova I, Zavalova L (2008)
• «Удвоение»: идентификация и характеристика тандем-гирудина из азиатской медицинской пиявки Hirudinaria manillensis — Lukas P et al. (2022)
• Применение медицинской пиявки в лечении заболеваний уха — Seleznev K et al. (1992)
• Рекомбинантная дестабилаза из Hirudo medicinalis способна растворять тромбы человека in vitro — Bobrovsky P et al. (2021)
• Влияние рассеяния углеродных нанотрубок в окружающей среде на водного беспозвоночного Hirudo medicinalis — Girardello R et al. (2015)

Все исследования, проанализированные ASH →