Hialuronidasa novedosa de alto rendimiento procedente de sanguijuela para acelerar la preparación de oligómeros específicos de hialuronano

Hyaluronidases (HAases), particularly leech HAases, have attracted intense attention due to their broad applications in medical treatments and great potential for the enzymatic production of hyaluronan oligosaccharides. However, little is known about this third interesting family of HAases. Here, we applied the random amplification of cDNA ends polymerase chain reaction (RACE-PCR) approach to identify the first leech HAase-encoding gene. By combining protein engineering and high-density culture, we achieved high-level production (8.42 × 10(5) U ml(-1)) in the yeast Pichia pastoris secretory expression system. Compared with the commercial bovine testicular HAase, the recombinant leech HAase exhibited superior enzymatic properties. Furthermore, analysis of the hydrolytic process suggested that this novel enzyme adopts a nonprocessive endolytic mode, yielding a narrow-spectrum of specific HA oligosaccharides with different incubation times. Large-scale production of this novel leech HAase will not only greatly promote medical applications but also facilitate the enzymatic production of specific HA oligosaccharides.

Resumen tomado de PubMed (NCBI) para el registro citado, en el idioma original. La versión de referencia es la de la publicación original.

El resumen se deja sin traducir para conservar la redacción original de los autores.

Mediante RACE-PCR se identificó el primer gen de hialuronidasa de sanguijuela, expresado en Pichia pastoris combinando ingeniería de proteínas y cultivo de alta densidad, con una producción de 8,42 × 10⁵ U/ml. La enzima recombinante mostró mejores propiedades enzimáticas que la hialuronidasa testicular bovina comercial. Su análisis hidrolítico sugirió un modo endolítico no procesivo, con un espectro estrecho de oligosacáridos específicos de hialuronano según el tiempo de incubación. Los autores destacan su potencial para aplicaciones médicas y producción enzimática.

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